Ви-антиген (капсульный антиген сальмонелл тифи)

VI-АНТИГЕН — капсульный полисахаридный антиген некоторых энтеробактерий: Salmonella typhi, Escherichia coli, Citrobacter (Paracolobactrum ballerup). Применяется для серодиагностики, лечения и профилактики брюшного тифа. Впервые Vi-антиген описан в 1934 г. Феликсом и Питтом (A. Felix, R. Pitt), которые считали, что он определяет вирулентность S. typhi, и назвали его антигеном вирулентности (отсюда и его название — «Vi-антиген»). Капсульное расположение Vi-антигена подтверждается серологическими исследованиями, согласно к-рым Vi-позитивные штаммы не агглютинируются О-сыворотками. Электронномикроскопические исследования показали, что Vi-антитела, меченные парааминофенилмеркурацетатом, обнаруживаются на поверхности целой клетки S. typhi Ту2 в виде гранул диаметром не более 10–12 нм (100–120 А). Дискретный характер расположения меченых антител отражает, по-видимому, топографию антигенных детерминант Vi-антигена (С. М. Соболев и соавт., 1966). Vi-антиген — полимер N-ацети-лированной аминогексуроновой к-ты, структурной единицей к-рого является 2-амино-2-дезокси-D-галактуроновая к-та. Полимер характеризуется выраженным положительным удельным вращением и устойчив к окислению перйодатом, что указывает на наличие альфа-(1-3) связей. Опыты с метилированием Vi-антигена, изолированного из E. coli 5396/38, показали, что в полимере имеется связь 1–4. Основной компонент изолированного Vi-антигена имеет мол. вес более 1 000 000. Препарат устойчив к кислотному гидролизу и термостабилен. При гидролизе концентрированной соляной к-той выход полисахарида составляет 80 %, и этот материал, идентифицированный как гидрохлорид D-аминогалактуро-новой к-ты, может быть кристаллизован с небольшим выходом. Vi-антиген выделяют из бактерий экстракцией изотоническим раствором хлорида натрия или дистиллированной водой. Подвергая энергичному встряхиванию при 3 000 колебаний в 1 минуту густую взвесь клеток S. typhi Ту2, удается получить капсульную фракцию, содержащую большое количество Vi-антигена. Очистку Vi-антигена от примеси О-антигена производят несколькими методами. Уэбстер (М. E. Webster) с соавт. (1953, 1954) предложила фракционирование экстракта этанолом и гидролиз уксусной к-той. При этом О-антиген разрушается, а резистентный Vi-антиген сохраняет свои свойства. Метод Уэбстер был модифицирован и приспособлен для производства Vi-антигена (Н.Б. Холчев, Д. Д. Ефимов, 1965). Описан метод очистки Vi-антигена экстракцией 60 % этанолом при t° 37° и многократным перессаждением при t° 0–5° цетавлоном [Бейкер (E. E. Baker) и соавт., 1959, 1960]. Vi-антиген очищается также бумажным электрофорезом или адсорбцией на колонке с формалинизированной стромой эритроцитов. Vi-антиген, изолированный методом Уэбстер из S. typhi, P. ballerup и E. coli, содержит нек-рую примесь О-антигена, серологически активен, и препараты, обладая одинаковой антигенной специфичностью, несколько различаются по вязкости. Полимерный препарат Vi-антигена более антигенен для мышей, но менее антигенен для кроликов. Так, протективная активность гомогенного высокополимерного Vi-антигена в 40 раз выше, чем деполимеризованного и деацетилированного. При иммунизации людей деполимеризованным и деацетилированным антигеном наблюдается продукция специфических антител, к-рые реагируют с нативным Vi-антигеном. При деполимеризации и деацетилировании снижается его протективная активность [Ланди (М. Landy) и соавт., 1963]. Протективная активность Vi-антигена зависит от числа содержащихся в нём ацетильных групп. Vi-антигены, полученные по методу Бейкера или при помощи электрофореза из Vi-позитивных штаммов, также не отличаются по хим. составу, физ. свойствам и биол, активности. Однако Д. Д. Ефимов (1964, 1965) отмечает нек-рые серологические различия между Vi-антигеном S. typhi Ту2 и Vi-антигеном Р. ballerup.

Роль Vi-антигена как рецептора фага впервые показана в 1936 г. несколькими исследователями [Крейги, Брандон (J. Craigie, К. Brandon) и др.]. Установлено, что способность изолированного Vi-антигена тормозить активность Vi-фага зависит от присутствия в антигене О-ацетильных групп. При иммуноэлектрофоретическом исследовании разных препаратов Vi-антигена обнаружено две фракции, различающиеся по подвижности и мол. весу, но идентичные по антигенной специфичности. Рецептор Vi-фага содержится в медленно двигающейся фракции. Гетерогенность изолированного Vi-антигена продемонстрирована аналитическим ультрацентрифугированием и гель-фильтрацией. Синтез Vi-антигена в бактериальной клетке детерминирован двумя генами: ViB, связанным с Vi-inl-purA-pyrB, и Vi А, локализованным вблизи от his-0-антигенного локуса — 04 или 09 фактора.

Vi-позитивные штаммы S. typhi более вирулентны для человека, чем Vi-негативные, однако это положение относительно. Описаны Vi-негативные штаммы, напр, штамм Т-5501 и др. [Стандфаст (A. Standfast), 1960], S. typhi, которые оказались вирулентными для человека и лабораторных животных. Изолированный Vi-антиген используется для приготовления эритроцитарного Vi-диагностикума. Вакцины, приготовленные из Vi-позитивного штамма (напр., Ту2-4446), защищают мышей против внутрибрюшинного заражения как Vi-позитивным, так и Vi-негативным штаммом, однако вакцины из Vi-негативного штамма не защищают мышей против заражения Vi-позитивным штаммом. Иммунизация людей против брюшного тифа (см.) производится либо убитыми корпускулярными вакцинами, состоящими из Vi-позитивного штамма, или препаратами, состоящими из растворимых антигенных комплексов S. typhi и содержащими Vi-анти-ген. М. П. Покровской (1965) с соавт, предложена спиртовая корпускулярная брюшнотифозная вакцина, обогащённая изолированным Vi-антигеном. Однако роль Vi-антигена в формировании специфического иммунитета против брюшного тифа у людей окончательно не выяснена.